风湿骨痛宁胶囊的主要药效学试验报告
摘要 通过试验研究，证明风湿骨痛宁胶囊（骨痛胶囊）具有：①抗炎作用：对抗致炎剂引起皮肤毛细血管通透性增高，抑制巴豆油诱发耳壳水肿；抑制角叉菜胶、甲醛所致踝关节肿胀；抑制棉球肉芽肿的形成。②镇痛作用：提高耐热痛阈值，减少醋酸扭体的发生频率。③免疫作用：增强网状内皮系统吞噬功能，对血清溶血素、凝集素效价均无明显影响；对环磷酰胺引起抗体形成细胞降低似有一定的提升作用；对DNCB所致迟发型超敏反应有显著的增强作用；增加外周血T淋巴细胞百分数。④对血液循环系统的影响：血液流变学中全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、纤维蛋白含量与正常对照动物相比，均有明显差异。毛细血管网交叉点数增多，血液流态显著改善。湿骨痛宁胶囊（骨痛胶囊）是山西曲沃传统医学研究所所长曹子青博士与北京朝阳门医院合作，用中医药治疗骨关节及关节周围疼痛的经验总结。经多年基础实验和临床研究，创制的新验方制剂。风湿骨痛宁胶囊（骨痛胶囊）由杜仲、川续断、生晒参、怀牛膝、黄芪等味地道中药材组成，具有补肝益肾、强壮筋骨、补益气血、驱风散寒、活血通络之功效。治疗以骨关节病，关节肌肉痛为主引起的关节冷痛，酸楚麻木，肿胀僵硬，屈伸不利，腰膝酸软，气短乏力等证。类似于现代医学自身免疫性疾病的类风湿性关节炎、风湿性关节炎，以及累及脏腑者；软骨营养障碍，发育不全，骨质增生，肩周炎、软骨钙沉着病，假性痛风等。骨痛胶囊还用于氟骨病、肝肾不足风寒肿络症见上述诸证候者，在临床上均取得非常显著的疗效。根据处方的功能主治，从抗炎、镇痛、免疫、血液循环及血液流变学等四个方面进行了主要药效学的研究，现将试验结果报告如下。
一、风湿骨痛宁胶囊的抗炎作用
受试药物 风湿骨痛宁胶囊 山西曲沃传统医学研究所提供，含0.35g生药，批号：981225；受试药物在试验时用蒸馏水配制成40%浓度的混悬液。风湿骨痛宁胶囊设高、中、低三个剂量组，按动物与人体重量折算，分别相当于临床试用剂量的100倍、50倍、25倍。阳性对照药壮骨丸，南方制药厂生产，批号：980421，用量为临床剂量的100%。
动物 小白鼠，瑞士种，19±1g体重，雄性，由山西中医学院药理教研室动物房提供。
试剂 巴豆油，日本和光株式会社产品，批号DCCL7737：角叉菜胶，Sigma公司产品，批号45F—0427。
仪器 GD272连续式分光光度计，上海医用分析仪器厂生产。
1、对巴豆油致小鼠耳壳水肿的影响
方法 鼠耳肿胀法。小鼠按体重随机分组，灌胃给药，正常对照组给予相同体积的蒸馏水。药后1小时，用2%巴豆油0.05ml涂于左耳前后两面，右耳为对照，致炎后4小时将小鼠处死。沿耳廓基线剪下两耳，用直径8mm的不锈钢冲子在同一部位分别冲下耳片，在电子天平上称重。以左右耳片的重量差为肿胀度，计算出各组肿胀度均值，作t检验，比较组间差异性。
结果 风湿骨痛宁胶囊8.4g/kg和4.2g/kg一次给药，对巴豆油引起的小鼠耳水肿均有非常显著的抑制作用（见表1）。
表1 风湿骨痛宁胶囊对巴豆油诱发小鼠耳水肿的作用
|
组 别 |
剂量 （g/kg） |
鼠数 （只） |
耳肿胀值（X±SD） （mg） |
抑制率 （%） |
P值 |
|
对 照 组 |
|
10 |
28.9±4.86 |
|
|
|
风湿骨痛宁胶囊 |
8.4 |
10 |
21.0±3.59 |
28.19 |
＜0.01 |
|
|
4.2 |
10 |
22.4±3.81 |
18.29 |
＜0.01 |
|
壮 骨 丸 |
2.6 |
10 |
22.8±7.5 |
20.44 |
＜0.05 |
2、对皮肤毛细血管通透性的影响
方法 小鼠按体重随机分组后，一次灌胃不同剂量的风湿骨痛宁胶囊及阳性对照药壮骨丸，空白对照组给予相同体积的蒸馏水，1小时后，尾静脉注射0.5%伊文思兰液0.2ml/10g，立即于去毛腹部皮肤上滴二甲苯40ul，15分钟后处死动物，取兰染皮肤剪碎，放于蒸馏水：丙酮（3:7）混合液中，20小时后离心取上清液，在波长590nm下测光密度值，进行统计学处理。
结果 8.4g、4.2g和2.1g/kg剂量下，能显著抑制二甲苯引起的小鼠皮肤毛细血管通透性的增高，其作用明显优于阳性对照药壮骨丸（见表2）。
表2 风湿骨痛宁胶囊对小鼠皮肤毛细血管通透性的作用
|
组 别 |
给药剂量 （g/kg） |
动物数 （只） |
光密度值（OD） （X±SD） |
抑制率 （%） |
P值 |
|
|
与对照组比较 |
与壮骨丸比较 |
|||||
|
对 照 组 |
|
10 |
0.263±0.090 |
|
|
|
|
风湿骨痛宁胶囊 |
8.4 |
10 |
0.158±0.052 |
39.98 |
＜0.01 |
＜0.05 |
|
|
4.2 |
10 |
0.157±0.048 |
40.36 |
＜0.05 |
＜0.05 |
|
|
2.1 |
10 |
0.211±0.106 |
19.78 |
＞0.05 |
＞0.05 |
|
壮 骨 丸 |
2.6 |
10 |
0.233±0.098 |
11.34 |
＞0.05 |
|
3、对大鼠踝关节肿胀的抑制作用
方法 用软尺测定大鼠踝关节周长，周长为基础值。空白对照组给相同体积的蒸馏水。灌胃给药后1小时，每只大鼠右踝关节皮下注射致炎剂0.1ml，致炎后1、2、4、6小时分别各测一次踝关节周长。计算出肿胀值（致炎后周长与致炎前周长之差），分别比较各时间点给药组与对照组之间的差异性，按下列公式计算肿胀率与给药组的肿胀抑制率。
肿胀率E（%）= 
×100%
肿胀抑制率I（%）= 
×100%
（1）对大鼠角叉菜胶性踝关节肿胀的影响
以8.4、4.2和2.1g/kg风湿骨痛宁胶囊一次给药，药后1小时，用1%角叉菜胶致炎，测定致炎后不同时间的肿胀值。在6小时的观察期间，三个剂量组均有不同程度的抑制效果，其作用持续时间与所用剂量有关（见表3）。
表3 风湿骨痛宁胶囊对大鼠角叉菜胶性踝关节肿胀的影响
|
组 别 |
给药剂量 （g/kg） |
鼠 数 （只） |
致炎后肿胀值（mm，X±SD）（抑制率%） |
|||
|
1h |
2h |
4h |
6h |
|||
|
对照组 |
|
10 |
0.22±0.07 |
0.53±0.09 |
0.62±0.08 |
0.44±0.05 |
|
风湿骨痛宁 胶 囊 |
8.4 |
10 |
0.13±0.09★ |
0.38±0.04★★ |
0.48±0.10★★ |
0.38±0.05★ |
|
|
4.2 |
10 |
0.14±0.05★★ (35.2) |
0.36±0.09★★ |
0.48±0.06★★ (22.2) |
0.39±0.07 |
|
|
2.1 |
10 |
0.17±0.06 |
0.43±0.07★ |
0.54±0.08★ |
0.42±0.04 |
|
壮 骨 丸 |
1.3 |
10 |
0.15±0.06★ |
0.40±0.11★★ |
0.50±0.11★★ (20.1) |
0.40±0.07 |
注：与对照组比较 ★ P＜0.05 ★★ P＜0.01 下表均同
（2）对大鼠甲醛性踝关节肿胀的影响
大鼠按体重随机分组，灌胃给药，药后1小时用2.5%甲醛致炎，致炎后不同时间测肿胀值，并连续给药四天，每天一次，第2~4天均在药后1小时测量踝关节肿胀值。结果由表4可见，风湿骨痛宁胶囊高剂量组从致炎后2小时即呈现明显的抑制踝关节肿胀的作用，并持续到72小时；中剂量组从致炎后6小时到48小时亦有明显的效果；低剂量组与对照组相比无显著性差异。阳性对照药壮骨丸仅在致炎后6小时有抑制效果。
表4 风湿骨痛宁胶囊对大鼠甲醛性踝关节肿胀的影响
|
组 别 |
给药剂量 （g/kg） |
鼠 数 （只） |
致炎后肿胀值（mm，X±SD）（抑制率%） |
||||
|
2h |
6h |
24h |
48h |
72h |
|||
|
对照组 |
|
10 |
0.30±0.11 |
0.61 | |||